تشخیص هیستیدین اساسی در عمل کاتالیتیکی آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز غشایی کبد موش صحرایی نر

نویسندگان

اسفندیار حیدریان

esfandiar heidarian department of biochemistry, ilam university of medical sciences, ilam, iranگروه بیوشیمی بالینی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی ایلام بهرام حقیقی

bahram haghighi

چکیده

سابقه و هدف: آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز (pap) باعث تبدیل اسید فسفاتیدیک به دی آسیل گلیسرول و فسفات معدنی (pi) می شود. دو فرم مختلف از آنزیم pap در سلولهای کبدی موش صحرایی گزارش شده است، یکی pap1 که در متابولیسم فسفولیپیدها و گلیسرولیپیدها و دیگری  pap2که در پدیده signal transduction نقش دارد. pap2 در موش صحرایی دارای دو ایزوفرم pap2a و pap2b  می باشد. در این مطالعه وجود هیستیدین اساسی در آنزیم pap2b مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها: با استفاده از n- اکتیل گلوکوزید، غشای سلول های کبدی موش صحرایی حل گردید و pap2b طی چندین مرحله ی کروماتوگرافی تخلیص گردید. ثابت های کینتیکی بــر اساس مدل کینتیک رقت سطحی تعیین گردیدند. جهت تعیین خلوص، تعداد و وزن زیرواحدهای آنزیمی از روش الکتروفورز ناپیوسته در حضور sds با ژل پلی اکریل آمید 10 درصد استفاده گردید. تعداد مول هیستیدین موجود در یک مول آنزیم با استفاده از مشتق –n کربتوکسی هیستیدین محاسبه شد.نتایج: pap2b تخلیص شده فعالیت ویژه ای معادل mu/mg protein7350 داشت. الکتروفورز pap2b تخلیص شده در حضور sds یک نوار با وزن مولکولی 8/33 کیلودالتون نشان داد. مطالعات غیرفعال سازی آنزیم به وسیله معرف دی اتیل پیرو کربنات شواهدی بر ضرورت وجود هیستیدین اساسی برای فعالیت آنزیم مهیا کرد. تعداد مول هیستیدین تعدیل شده به ازای هر مول آنزیم 6 عدد بود. نتیجه گیری: مهار آنزیم توسط دی اتیل پیرو کربنات نسبت به اسید فسفاتیدیک رقابتی بود و نشان از حضور هیستیدین در مکان فعال آنزیم داشت. احتمالا واکنش کاتالیتیکی pap2b  نیز می بایستی همانند سایر اعضای خانواده اش از طریق تشکیل واسطه ی فسفوهیستیدنی انجام گیرد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تاثیر پودر پسته وحشی بر فعالیت آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز و پروفیل چربی‌های خون موش صحرایی

مقدمه: آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز ، دفسفوریلاسیون فسفاتیدات به دی آسیل گلیسرول و فسفات معدنی2 را کاتالیز می‌کند. این واکنش مرحله تنظیمی و محدودکننده سرعت متابولیسم گلیسرولیپیدها است. دی آسیل گلیسرول تولیده شده پیش‌ساز سنتز فسفولیپیدها و تری گلیسریدها است. هدف: در این مطالعه تاثیر پودر میوه Pistacia atlantica از خانواده Anacardiacea بر فعالیت آنزیم PAP کبدی، تری‌گلیسرید کبدی و پروفیل چربی‌ها...

متن کامل

علت عدم نیاز به یونMg2+ در آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز غشایی نسبت به فرم سیتوزولی آن در

چکیده مقدمه: آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز (PAP) تبدیل اسید فسفاتیدیک به دی‌آسیل گلیسرول و فسفات را کاتالیز می‌کند. این آنزیم در کبد موش صحرایی دارای دو فرم می‌باشد. یک فرم سیتوزولی (PAP1) در متابولیسم گلیسرولیپیدها نقش داشته و برای فعالیت نیازمند یون Mg2+ می‌باشد. فرم دیگر آن(PAP2) غشایی است که در Signal transduction دخیل است و جهت فعالیت خود نیازی به یون Mg2+ ندارد. PAP2 دارای دو ایزوفرم PAP2a...

متن کامل

بررسی اثر روغن کنجد بر فعالیت آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز کبد و میزان لیپوپروتئینهای سرم خرگوشهای هیپرکلسترولمیک

چکیده زمینه و هدف: امروزه نقش گیاهان دارویی درکاهش بیمار یهای قلبی- عروقی از جمله آترواسکلروز اثبات شده است. آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولازکبدی آنزیمی کلیدی در متابولیسم گلیسرولیپیدها است . بنابراین، هدف از این تحقیق شناخت اثر روغن کنجد برفسفاتیدات فسفوهیدرولازکبدی، میزان کلسترول و تری گلیسرید کبدی و لیپوپروتئین های سرم خرگوش های هیپرکلسترولمیک بود. روش بررسی: در این تحقیق تجربی تعداد 27 خرگ...

متن کامل

تأثیر برگ آرتیشو (l. cynara scolymus) بر میزان فعالیت آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز کبد، تری گلیسرید کبد، میزان چربی ها و لیپوپروتئین های سوم موش صحرایی نر هیپرلیپیدمیک

چکیده: مقدمه: افزایش بیش از حد کلسترول خون نقش مهمی در تصلب شریان یا آرتروسکلروز ایفاء می کند. برگهای آرتیشو در گذشته در طب سنتی در بسیاری از بیماریها به خصوص افزایش چربی خون مورد استفاده قرار گرفته اند. فسفاتیدات فسفوهیدرولاز (pap) موجب تسریع کردن فسفرزدایی از فسفاتیدات می شود و این موجب ایجاد diacylglycerol و فسفات غیرآلی می شود. این آنزیم، تنظیم کننده کلیدی در متابولیسم گلیسرو لیپیدها می با...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
فیض

جلد ۱۲، شماره ۲، صفحات ۱-۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023